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吸光度a与透光率t之间的关系如何?分光光度法测定时a值取什么范

发布时间:2019-09-06 14:08 来源:未知 编辑:admin

  吸光度a与透光率t之间的关系如何?分光光度法测定时,a值取什么范围为宜?为什么

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  吸光度a与透光率t之间的关系如何?分光光度法测定时,a值取什么范围为宜?为什么

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  分光光度法测定时,一般要求吸光度A在0.2-0.8之间,因为当吸光度在0.187-0.824之间时,浓度的相对误差在2%以内。

  分光光度法:通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定

  性和定量分析的方法。它具有灵敏度高、操作简便、快速等优点,是生物化学实验中最常用的

  实验方法。许多物质的测定都采用分光光度法。在分光光度计中,将不同波长的光连续地照射

  朗伯一比尔(Lambert - Beer)定律是分光光度法的基本原理。当一束单色光通过一均匀的溶液时,一部分被吸收,一部分透过,设入射光的强度为I0,透射光强度为I,则I/I0为透光度,用T表示。

  1.当溶液的液层厚度不变时,溶液的浓度越大,对光的吸收程度越大,则透光度越小。

  当溶液浓度不变时,溶液的液层厚度越大,对光的吸收程度越大,则透光度越小。

  2.研究表明:溶液对光的吸收程度即吸光度(A)又称消光度(E)或光密度(OD)与透光度(T)呈负对数关系,即:A=-lgT

  因此A=a*b*c,即朗伯一比尔定律,其意义为:当一束单色光通过一均匀溶液时,溶液对单色光的吸收程度与溶液浓度和液层厚度的乘积呈正比。

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